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7月3日,在《自然》杂志发表的一项研究中,中国科学院生物物理研究所和加拿大多伦多大学的研究人员发现了一种名为AcrIF25的新型抗CRISPR蛋白,它通过拆除IF型CRISPR-Cas复合物(Csy复合物)来抑制CRISPR-Cas系统的活性,为精准调控CRISPR-Cas系统提供了新途径。
CRISPR-Cas 系统是一种强大的基因编辑工具,广泛用于细菌和古细菌,以防御外来 DNA 的入侵。为了平衡这种强大的防御机制,一些细菌和古细菌进化出了能够抑制 CRISPR-Cas 系统活性的蛋白质,称为抗 CRISPR 蛋白(Acr)。
这项研究中,研究人员首先利用生物信息学方法鉴定出一种名为AcrIF25的新型抗CRISPR蛋白,体内实验表明,AcrIF25显著抑制了铜绿假单胞菌的IF型CRISPR-Cas系统的活性。
尺寸排阻层析结果显示,AcrIF25并不直接与完整的Csy复合物结合,而是特异性地与Cas7亚基相互作用并将其从Csy复合物上解离下来,从而阻断CRISPR-Cas系统的功能。
为了进一步阐明AcrIF25的作用机制,研究人员解析了AcrIF25和Cas7:AcrIF25复合物的晶体结构,发现AcrIF25通过其C末端结构域与Cas7相互作用,该结构域覆盖了Cas7亚基之间的结合界面以及Cas7与crRNA之间的界面,因此AcrIF25的结合会破坏Cas7与相邻Cas7亚基和crRNA的相互作用,从而导致整个Csy复合物的解体。
值得注意的是,AcrIF25 无需使用来自 ATP 水解的能量即可从 Csy 复合物中去除 Cas7 亚基。AcrIF25 是首个无需外部能量供应即可分解大型稳定蛋白质-核酸复合物的蛋白质。
该研究不仅丰富了我们对Acr蛋白作用机制的理解,也为未来开发新的基因编辑工具提供了宝贵的线索。
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