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微小RNA(miRNA)是诊断和预后疾病的宝贵生物标记。2024年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家维克多·安布罗斯和加里·鲁夫昆,以表彰他们发现在转录后基因调控中发挥重要作用的miRNA。
许多miRNA与肿瘤的发生发展密切相关,包括细胞增殖、侵袭等,建立可靠的miRNA诊断模型有助于早期发现多种高危癌前病变。
中国科学院苏州生物医学工程技术研究所(SIBET)的研究人员最近提出了一种基于DNA纳米结构解离辅助应变促进炔烃-叠氮化物环加成(SPAAC)连接的新策略,用于高灵敏检测miRNA(见图1)。
在缪鹏教授团队的带领下,研究人员设计了一个三维DNA三角锥台(TPF)作为目标识别的支架,它不仅保留了具有三个硫醇顶点的DNA三角形底部以牢固固定在金表面,而且还提供了三个单链侧边用于后续DNA结构转变。
该研究成果以“DNA纳米结构解体辅助SPAAC连接用于电化学生物传感”为题发表在《NanoLetters》杂志上。
在目标miRNA存在的情况下,利用双链特异性核酸酶(DSN)消化DNATPF顶端的单链DNA,导致DNA三角的恢复,有利于接下来的SPAAC连接定位多条信号链。
SPAAC是叠氮化物与环辛基炔烃之间一种无需金属和酶参与的点击反应,具有高选择性和生物正交性,适用于DNA纳米结构离散位点的连接。
由于DNATPF侧边的设计,可以形成多个含有二茂铁的发夹结构,从而缩短了电化学物质与电极之间的距离(见图2)。
通过记录和分析反应过程,研究人员建立了一种高灵敏度的电化学生物传感器,该传感器具有较高的灵敏度和重现性,临床应用表现出良好的稳定性(见图3)。
该传感策略依赖于DNA纳米结构和点击化学的整合,这可能启发DNA纳米技术开发和临床化学应用的进一步设计。
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